MBL开发并销售RIP Assay Kit, 此试剂盒利用针对RBP(RNA结合蛋白)的抗体,可以对RBP与mRNA的复合物(mRNP)进行免疫沉淀(RIP),还可以对RBP上结合的mRNA进行全面性分析。
◎最适合RIP-Assay使用的缓冲液套装。
◎不使用苯酚,采用独有的高产率RNA提取试剂,因此没有废弃物困扰。
◎可以高产率、高品质的回收适用于各种RIP-Assay后分析的RNA
RIP-Assay Kit 实施示例
细胞: Jurkat
细胞计数: 1 x 106 cells/sample
抗体: Normal Rabbit IgG
Anti-PTBP1 (Human) pAb (RN011P)
抗体使用量: 15 µg
1.用WB确认,经免疫沉淀后的RNP
2.用NanoDrop确认分离得到的RNA的量
3.对分离得到的RNA进行解析
4.用RT-PCR对分离得到的RNA进行鉴定
Jurkat细胞内,与PTBP1结合的RNA经RIP-Assay Kit分离后,利用基因特异引物对其进行RT-PCR鉴定。检出了CD40LG等、在文献中确认过的PTBP1结合RNA。利用RIP-Certifiled Anti PTBP1 Antibody免疫沉淀后得到的样品中,检测出了利用normal rabbit IgG免疫沉淀的样品中检测不到的CD40LG。由此可以证明,RIP-Assay Kit适用于对RNP复合物中结合的mRNA进行分型。